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纳米抗体CRO服务
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纳米抗体研发技术加速服务平台
耀海生物拥有丰富的纳米抗体研发及生产经验，以强大的技术平台、先进的生产设备，以及在纳米抗体全生态表达系统的开创性技术，致力于为客户提供从菌株构建、多功能纳米抗体表达与纯化，及大规模生产的一站式纳米抗体研发生产服务，高效灵活以满足客户不同实验或项目需求。

  • 全生态表达系统

    全生态重组表达系统

    E.coli原核表达系统、酵母真核表达系统（毕赤酵母）、哺乳动物细胞表达系统

  • 多样化纳米抗体类型

    多样化纳米抗体类型

    单域纳米抗体、二价纳米抗体、多价纳米抗体

  • 成熟完善纯化平台

    成熟完善纯化平台

    齐全纯化平台，组合式纯化方式，高效灵活

  • μg至kg

    μg至kg

    灵活的生产规模

目前，耀海生物建立了全生态的纳米抗体表达体系，现有的表达系统包括：E.coli原核表达系统、酵母表达系统（毕赤酵母）、哺乳动物细胞表达系统，熟练运用多种表达宿主菌，根据客户的实际需求，为客户提供合适且高质量的表达体系。

20+品质开发经验积累

不同大肠杆菌宿主灵活选择

不同表达载体高效选择

10+品种开发经验储备

不同毕赤酵母宿主灵活选择

PAOX1甲醇诱导表达系统

PGAP组成型表达系统

5+品种纳米抗体开发丰富经验

瞬转表达纳米抗体

稳转株表达纳米抗体

  • E.coli原核表达系统
    大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早、应用最广且最为经济实惠的经典表达系统。大肠杆菌具有遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点。
    纳米抗体的分子质量小、结构简单，能被单个基因编码，利用基因工程能在大肠杆菌等原核微生物中大量表达。
    耀海生物可以利用大肠杆菌在胞质或者通过信号肽周质空间表达纳米抗体，其已经表达纳米抗体种类在20种以上。
  • 酵母表达系统（毕赤酵母）
    酵母表达系统，是工业生产中应用较为广泛的系统，其遗传背景清楚安全，兼具原核和真核表达系统的优点：增殖快、可在廉价培养基中进行高密度发酵、能进行复杂的翻译后修饰、且分泌表达能力强大，有效降低下游纯化成本。纳米抗体的分子质量小、结构简单，能被单个基因编码，利用基因工程能在酵母菌等微生物中大量表达。
    耀海生物可提供纳米抗体高表达菌株的筛选与发酵工艺开发，采用高密度发酵，利用毕赤酵母PAOX1诱导表达纳米或PGAP组成行表达10多种不同纳米抗体，表达量最高可以达到10 g/L以上。
  • 哺乳动物细胞表达系统
    哺乳动物细胞表达系统能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。
    耀海生物可以利用哺乳动物细胞CHO系列细胞通过瞬转方法或者构建稳转株来表达多种不同纳米抗体。利用CHO系列细胞瞬转表达纳米抗体，表达量可以达到20mg/L;CHO系列细胞稳转株表达纳米抗体，表达量可以达到15mg/L。
纳米抗体表达服务内容
由客户提供纳米抗体基因序列（或者氨基酸序列），选择表达宿主细胞，耀海生物提供一站式基因合成到纳米抗体表达与纯化服务、生产的全方位定制纳米抗体服务。
步骤 服务内容 周期 交付
纳米抗体表达工程菌构建（可以选择毕赤酵母，大肠杆菌或者哺乳动物细胞）


1.大肠杆菌表达系统（胞质或周质空间表达）


2.毕赤酵母表达系统（可以选用甲醇诱导型表达系统PAOX1或者组成型表达系统PGAP）


3.哺乳动物表达系统（通过瞬转或者稳转来表达纳米抗体）


 大肠杆菌1-2周（不包括基因合成周期）
毕赤酵母2-3周
哺乳动物瞬转1-2周 稳转株2个月左右		 纯化得到的纳米抗体， 纯化抗体检测报告 SDS-PAGE, SEC-HPLC（选做）、RP-HPLC（选做）和CE-SDS（选做）纯度分析方法
小量表达纯化（标签） 对构建的工程菌纳米抗体表达，对1L表达体积的蛋白进行纯化（推荐加标签）。 2-3周
大规模表达纯化 大规模发酵纳米抗体样品，同时对于发酵的纳米抗体进行表达纯化。 5-8周
服务优势
服务案例

利用微生物生产不同纳米抗体

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服务案例
利用微生物生产不同纳米抗体
利用毕赤酵母表达一价纳米抗体
利用毕赤酵母表达二价纳米抗体
利用毕赤酵母表达三价纳米抗体

纳米抗体纯化体系

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服务案例
纳米抗体纯化体系
通过对protein A亲核层析，对纳米抗体进行纯化。
根据PAGE胶检测结果计算纯化得到纳米抗体纯度为90%以上。
通过对离子层析，对纳米进行纯化。
根据PAGE胶检测结果计算纯化得到纳米抗体纯度为95%以上。

纳米抗体质量评价体系

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服务案例
纳米抗体质量评价体系
通过SDS-PAGE、SEC-HPLC对纯化的纳米抗体进行纯度分析，发现纯化的纳米抗体纯度可以达到95%以上。
通过SEC-HPLC对纯化的纳米抗体进行纯度分析，发现纯化的纳米抗体纯度可以达到99%以上。
通过CE-SDS对纯化的纳米抗体进行纯度分析，发现纯化的纳米抗体纯度可以达到98%以上。

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microbial expression system
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